*Departamento Científico – Grupo Binding Site do Brasil

O exame para quantificação de cadeias leves livres no soro, Freelite®, mudou o paradigma do diagnóstico e do tratamento de pacientes com transtornos de célula B. Como resultado de mais de 3.000 publicações comprovando a utilidade clínica do Freelite®, os testes foram reconhecidos pelo Grupo Internacional de Trabalho sobre Mieloma e incorporado em suas diretrizes^1,2.

O  Freelite® é um imunoensaio específico e sensível para a determinação de cadeias leves livres kappa e lambda no soro.  Os anticorpos policlonais do teste, reagem apenas com as formas livres das cadeias leves (reconhecimento dos epítopos nas superfíceis expostas) proporcionando uma medição quantitativa de κ e λ livres no soro conforme figura 1 abaixo.

Figura 1. Reagentes do Freelite específicos para cadeias leves livres kappa e lambda ligam-se aos epítopos nas suferfícies expostas de cada cadeia.

O exame Freelite® é aprovado pelo FDA com intervalos de referência para Kappa Livre (κ), Lambda Livre (λ) e a razão κ/λ que foram validados em estudos clínicos em diversos trabalhos^3-11.

Figura 2. Intervalos de referência normais validados para o Freelite®.

Importante: a Binding Site desenvolveu os reagentes do Freelite® específicos para quantificação das cadeias leves livres no soro, urina e líquor que devem ser utilizados de acordo com recomendação clínica, condições específicas e instruções de uso dos produtos, já que para líquor e urina os intervalos de referência são diferentes dos utilizados para soro.

Conforme mencionado, a quantificação das cadeias leves livres em soro é recomendada pelas diretrizes do Grupo Internacional de Trabalho sobre Mieloma (International Myeloma Working Group – IMWG)² para o diagnóstico e  monitoramento do Mieloma Múltiplo. As recomendações atualizadas definem que a razão entre a cadeia envolvida e não envolvida deve ser ≥ 100 (valores baseados na utilização do Freelite®), e que a mesma é considerada como um dos biomarcadores do painel de exames² .

Isto significa que se um paciente apresenta células clonais na medula óssea ≥10% (comprovada por biópsia, por exemplo) e a cadeia leve livre produzida pelo tumor (envolvida) de ≥ 100 mg/L e a razão entre a envolvida/não envolvida é ≥ 100 o médico será capaz de estar alerta às condições deste paciente ou até mesmo diagnosticar o Mieloma Múltiplo, mesmo na ausência de outros sinais ou sintomas, como os critérios de CRAB por exemplo (hipercalcemia, anemia, doença renal, lesões ósseas).  Esse novo conceito é denominado de “eventos definitórios do mieloma” (SLIM do inglês), onde poderá ser utilizada: razão do Freelite® ≥ 100  ou mais de uma lesão focal na ressonância magnética ou mais de 60% de células plasmáticas na medula óssea).

 É importante salientar que os estudos demonstraram a utilização da razão do Freelite® ≥ 100 como biomarcador nos pacientes estudados, mas cada caso deve ser discutido e avaliado de acordo com as recomendações dos médicos responsáveis.

Figura 3. Freelite® considerado como biomarcador (evento definitório Mieloma) pelo IMWG.

Sabe-se que a alta concentração de cadeia leve livre monoclonal no soro está associada à proliferação maligna de células plasmáticas na maioria das Gamopatias Monoclonais, sendo assim, a razão de cadeias leves livres no soro (κ/λ) é um indicador sólido de monoclonalidade (doença). A produção de uma das cadeias leves livres alterada sobre a outra será refletida em uma razão κ/λ anormal (< 0,26 ou > 1,65). Este parâmetro, utilizado como um marcador tumoral, é extremamente valioso para diferenciar e indicar patologias monoclonais das patologias com elevações policlonais das cadeias leves livres como disfunção renal, infecções, imunodeficiências etc.

 A sensibilidade do Freelite® no soro faz com que seja possível quantificar κ e λ livre em concentrações muito baixas (até mesmo abaixo do intervalo normal no soro – figura 4), mesmo quando os níveis de proteínas monoclonais são indetectáveis pelos métodos tradicionais do painel de exames, como a eletroforese de proteínas e a imunofixação. A sensiblidade do Freelite® se deve ao fato de este ser uma ensaio policlonal, permitindo um reconhecimento amplo da grande variedade de epítopos encontrados nas cadeias leves livres κ e λ, uma vez que estas são altamente polimórficas. Dessa forma, para o diagnóstico e o monitoramento dos pacientes seja mais efetivo, o ensaio para detecção de cadeias leves livres no soro deve ser capaz de reconhecer as mais variadas formas destas proteínas.

 Isto significa que o Mieloma Múltiplo pode ser detectado precocemente, com uma maior confiabilidade, e uma maior qualidade de vida pode ser proporcionada aos pacientes com a utilização do Freelite®.

Figura 4. Sensibilidade do Freelite é superior aos métodos eletroforéticos tradicionais.

EFPs: eletroforese de proteínas no soro

EZC: eletroforese por zona de capilaridade

IFSs: Imunofixação no soro

EFPu: eletroforese de proteínas na urina

IFSu: imunofixação na urina

A especificidade do Freelite® (reação ocorre apenas com as formas livres de κ e λ) possibilita a determinação exata e confiável de proteínas monoclonais em comparação com a determinação de cadeias totais κ e λ (chamado de ensaio de cadeia leve ou cadeia leve total).  Ao contrário do Freelite®, os ensaios de cadeia leve total não distinguem as quantidades de cadeias leves livres dentro da grande concentração de cadeias leves ligadas às cadeias pesadas (como parte da estrutura das imunoglobulinas), podendo levar à uma má interpretação dos resultados. Para evitar que isso ocorra, peça Freelite® pelo nome.

 A quantificação das cadeias leves livres no soro é muito útil ainda para o monitoramento dos pacientes em tratamento. A alta sensibilidade do Freelite® e a meia-vida curta das cadeias leves livres faz com que seja possível um rastreamento preciso e com detecção precoce de recaída, possibilitando ainda uma avaliação confiável da doença residual. A utilização do Freelite® também nesta fase de monitoramento faz com que os médicos saibam exatamente a quantidade de cadeias leves livres que está sendo produzida pelo paciente e proporciona confiança para alterações no protocolo de tratamento (como a mudança de quimioterápicos), caso seja necessário.

Para auxiliar ainda mais no monitoramento preciso dos pacientes, o Freelite® pode ser utilizado em conjunto com o exame Hevylite®, que também já foi descrito nas diretrizes internacionais, como único teste também baseado em anticorpos policlonais, para medição precisa das imunoglobulinas intactas¹².

O Hevylite® permite a identificação individual de diferentes tipos de cadeia leve de cada classe de imunoglobulina, isto é, IgGκ, IgGλ, IgAκ, IgAλ, IgMκ e IgM; e as moléculas são avaliadas em pares, como por exemplo: IgGκ/IgGλ para fornecer os valores de cada par de cadeia leve/pesada.

A utilização do Hevylite® tem diversas vantagens, como no auxílio à  eliminação da subjetividade no momento da interpretação dos resultados de eletroforese e imunofixação, pacientes com baixas concentrações de proteína monoclonal podem ser identificados precisamente com Hevylite®, já que a sensibilidade da eletroforese é limitada, e ele pode ainda auxiliar na identificação da doença residual e uma indicação precoce da recidiva^13-19. O Freelite® e o Hevylite® são biomarcadores independentes, mas que quando utilizados em conjunto proporcionam melhor monitoramento.

Somente a Binding Site comercializa o Freelite® que é o único exame com anticorpos policlonais:

• Mencionado pelo nome nas diretrizes do Grupo de Trabalho Internacional do Mieloma
• Com mais de 3000 publicações científicas comprovando sua utilidade clínica
• Participação no maior grupo de controle externo da qualidade (CAP) (>90% dos laboratórios) e 100% dos Hospitais Membros do NCCN (National Comprehensive Cancer Network) utilizam Freelite®
• Que pode ser utilizado em conjunto com Hevylite®

O Freelite® NÃO deve ser comparado a nenhum ensaio para quantificação de cadeias leves, pois ele possui características técnicas únicas. Dessa forma, outras marcas de exames não são intercambiávies com Freelite®.

Para informações sobre comparativos e informações técnicas do produto, faça contato com a nossa equipe de especialistas.

O instrumento adequado para detecção das cadeias leves livres utilizando o Freelite® está amplamente disponível em diversos laboratórios e hospitais no Brasil como por exemplo: Diagnósticos da América (DASA), Grupo Fleury, Diagnósticos do Brasil (DB), Hospital de Clínicas de São Paulo (DLC-USP), Hospital de Amor de Barretos, Instituto Nacional do Câncer-RJ, Hospital Clementino Fraga Filho- UFRJ, Hospital Albert Einstein, a+ Medicina Diagnóstica, Sérgio Franco Medicina Diagnóstica entre outros. Em outros países o Freelite® é também referência, sendo utilizado pelos principais grupos de medicina diagnóstica como:  Clínica Mayo, Quest, Labcorp, ARUP, Synlab etc.

Peça Freelite® pelo nome e garanta:

• Sensibilidade, especificidade, precisão, eficiência para liberação segura dos resultados;
• Facilidade na execução e rapidez na liberação dos resultados;
•  Custo-efetividade comprovados: o kit já vem com calibradores e controles incluídos, facilitando o seu uso e conferindo a segurança necessária ao resultado;
• Detecção automática de excesso de antígeno, situação muito frequente em amostras de pacientes com Mieloma Múltiplo;
• Intervalo de referência amplo (0.6 – 139.000mg/L);
• Diluições automáticas até o resultado final, sem interferências manuais garantindo maior confiança aos resultados;
• Assistência técnica e científica disponível em todo território nacional.

Freelite® é marca registrado do Grupo The Binding Site Ltda (Birmingham, Reino Unido) em certos países

Para mais informações, detalhes sobre o Freelite® e lista completa dos locais que realizam o exame, entre em contato com a nossa equipe pelo [email protected].

Referências

1. Dispenzieri A, et al. International Myeloma Working Group guidelines for serum-free light chain analysis in multiple myeloma and related disorders. Leukemia 2009; 23:215-224.
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4. Katzmann J, et al. Serum Reference Intervals and Diagnostic Ranges for Free _ and Free _ Immunoglobulin LightChains: Relative Sensitivity for Detection of Monoclonal Light Chains. Clinical Chemistry 48:9 1437–1444 (2002)
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